飼料中赭曲霉毒素A的測定，GB/T 30957-2014

飼料中赭曲霉毒素A（OTA）的測定是一個關鍵的質量控制步驟，以確保飼料的安全性。以下是關于飼料中赭曲霉毒素A測定的詳細過程：

一、引言

赭曲霉毒素A是由曲霉屬和青霉屬的真菌產生的次級代謝產物，具有強烈的腎臟毒性和肝臟毒性。在飼料中，赭曲霉毒素A的存在可能對動物健康產生不良影響，因此對其進行準確測定至關重要。

二、測定方法

飼料中赭曲霉毒素A的測定主要依據國家標準GB/T 19539-2004，其中包括薄層色譜法（TLC）和酶聯免疫吸附測定法（ELISA）兩種方法。

1. 薄層色譜法（TLC）

薄層色譜法被規定為仲裁方法，用于對飼料中赭曲霉毒素A的準確測定。該方法基于樣品在薄層色譜板上的分離和顯色反應，通過比較標準品和樣品的色譜斑點來定量測定赭曲霉毒素A的含量。

2. 酶聯免疫吸附測定法（ELISA）

酶聯免疫吸附測定法作為快速篩選法，在飼料中赭曲霉毒素A的初步檢測中廣泛應用。該方法基于抗原抗體反應原理，通過特定的酶聯免疫吸附試劑盒對樣品中的赭曲霉毒素A進行定量測定。

三、測定步驟（以ELISA法為例）1. 樣品準備

選取有代表性的飼料樣品，進行粉碎和混勻。

準確稱取一定量的粉碎后樣品，置于離心管中。

加入樣品提取液，震蕩提取后靜置并離心。

2. 稀釋與加樣

按照一定比例對離心上清液進行稀釋。

將稀釋后的液體加入檢測卡的加樣孔中。

3. 孵育與檢測

將檢測卡置于恒溫孵育器中反應一定時間。

將檢測卡插入儀器的檢測插口，讀取并打印結果。

四、注意事項

樣品提取液的制備應準確，并避免污染。

離心管放入時要注意配平，避免離心過程中出現問題。

稀釋時，應先加樣品稀釋液，再加離心上清液。

檢測卡在拆封后需盡快加樣，并在規定時間內完成讀數。

五、總結

飼料中赭曲霉毒素A的測定是確保飼料安全性的重要步驟。通過薄層色譜法或酶聯免疫吸附測定法，可以準確、快速地測定飼料中赭曲霉毒素A的含量，為飼料生產和動物飼養提供科學依據。