復合預混料中煙酸、葉酸的測定，GB/T 17813-2018

本方法適用于復合預混料和維生素預混料中煙酸、葉酸的測定。

測量范圍為每千克樣品中含煙酸的量在1000mg以上，含葉酸的量在500mg以上。

試樣中的煙酸、葉酸用水-甲醇-乙酸混合溶液提取。

將濾液注入高效液相色譜反相柱上進行分離。

用紫外檢測器在特定波長（如280nm）處定量測定。

甲醇：優級純。

三乙胺、冰乙酸。

己烷磺酸鈉（PICB6）：c〔CH3(CH2)5SO3Na〕=0.005mol/L（或ρ〔CH3(CH2)5SO3Na〕=941mg/L）。

標準溶液配制：包括煙酸標準貯備液、葉酸標準貯備液和煙酸、葉酸標準工作液。

提取液：由去離子水、冰乙酸、三乙胺和甲醇混合而成，pH為3.2。

磷酸緩沖液：包含磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀，用乙腈和去離子水定容，pH調節至6.5。

高效液相色譜儀。

色譜柱：如C18色譜柱（250mm×4.6mm, 5μm）。

超聲波水浴。

移液器、量筒、瓶塞等實驗器具。

樣品制備：取預混合飼料樣品，按照一定方法處理（如振蕩、離心、過濾等）得到待測溶液。

色譜條件：設置流動相、檢測波長、進樣量、柱溫等參數。例如，流動相可以是磷酸二氫鉀緩沖液和甲醇-乙腈的混合液，檢測波長可以為254nm。

進樣分析：將待測溶液注入高效液相色譜儀進行分析，記錄色譜圖和峰面積。

結果計算：根據標準曲線和峰面積計算飼料中煙酸、葉酸的含量。

在采樣、提取和測定過程中，應確保樣品的均勻性、完整性和避免污染。

提取劑的選擇和提取條件的控制是影響測定結果的關鍵因素。

注意儀器精度和操作規范，確保測定結果的準確性和可靠性。

高效液相色譜法測定復合預混料中煙酸、葉酸的方法簡便、快速、準確度和精密度高。

根據GB/T 17813-2018標準，本方法對煙酸和葉酸的檢出限和定量限較低，分別為0.015mg/kg和0.013mg/kg（煙酸）以及0.050mg/kg和0.043mg/kg（葉酸）。