細菌菌落總數與初始污染菌檢測，消毒技術規范(衛生部 2002年版) 第二部分（2.1.11.2.1）

根據不同的產品，選取合適的稀釋度。例如，對于食品或某些環境樣品，可能需要進行1:10或1:100的稀釋。

稀釋時，可以使用拍擊式均質器或其他混合設備來確保樣品的均勻性。

使用無菌吸管或吸頭，分別吸取不同稀釋度的樣品勻液，加入無菌平皿中。

向每個平皿中加入適量的熔化并冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基，混合均勻。

待瓊脂凝固后，將平皿翻轉，并放入恒溫箱中，在適當的溫度下（如35℃±2℃）培養一定時間（通常為24小時或48小時）。

如果樣品中可能含有在瓊脂培養基表面彌漫生長的菌落，可以在瓊脂表面覆蓋一層薄層瓊脂培養基，然后再進行培養。

培養結束后，對平皿上的菌落進行計數。一般選取菌落數在30CFU~300CFU之間的平板進行計數。

如果一個平板上有較大的片狀菌落，那么這個平板不宜用于計數，而應選擇無片狀菌落生長的平板。

當平板上出現菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，應將每條單鏈作為一個菌落計數。

記錄每個稀釋度平板上的菌落數，并計算平均值。

根據稀釋倍數和菌落數，計算出原始樣品中的細菌菌落總數或初始污染菌數。

在整個檢測過程中，必須嚴格遵守無菌操作規范，以防止污染和誤差。

定期對培養基、設備和環境進行監測，以確保其符合檢測要求。

如果在檢測過程中出現空白對照有菌落生長的情況，那么該批次的檢測結果應視為無效，并重新進行檢測。

稀釋液的均勻性對檢測結果有很大影響，因此在稀釋過程中應確保樣品的均勻性。